菲羅門(mén)手性色譜柱常見(jiàn)問(wèn)題
1.使用手性柱時(shí)柱壓過(guò)高是什么原因造成的呢？
長(zhǎng)期超壓會(huì)引起柱頭塌陷，反壓上升，柱效下降。
原因：
?流動(dòng)相或樣品溶液過(guò)濾不徹底，固體顆粒堵塞管路或柱頭，會(huì)引起柱壓過(guò)高。
?樣品中成分在柱頭析出或強(qiáng)烈吸附，會(huì)引起柱壓升高。
?流速過(guò)快，會(huì)引起柱壓過(guò)高，特別是當(dāng)使用粘度高的溶劑，如IPA, EtOH，流速應(yīng)控制在0.1-0.3 ml/min
解決辦法：
?遵循每種柱子的特定的承壓范圍
?徹底過(guò)濾流動(dòng)相及樣品溶液
?樣品預(yù)處理
?更換流動(dòng)相時(shí)，或者剛把柱子剛接上儀器的時(shí)候，逐步增加流速
?儀器設(shè)定保護(hù)柱壓
2.化合物在手性柱中的“殘留效應(yīng)”經(jīng)常會(huì)對(duì)影響手性柱的分離度和出峰時(shí)間等，該如何處理？ 如何沖洗？
殘留物在普通流動(dòng)相中可長(zhǎng)時(shí)間地穩(wěn)定保留
?用醇洗滌可除去大部分的堿性殘留物
?用酸洗滌也可除去堿性殘留物
?用堿洗滌可除去酸性殘留物
?推薦分開(kāi)使用酸性條件手性柱和堿性條件手性柱
3.手性柱譜圖中異構(gòu)體的分離度下降了，可能是什么原因，該怎么辦？
分離度下降的原因有可能是色譜柱以外的色譜條件發(fā)生了變化，或者色譜柱受損柱效發(fā)生了變化。
首先查看是否是因?yàn)闇囟?、流?dòng)相成分等外在因素發(fā)生了變化導(dǎo)致分離度下降，如果排除了各種外在因素就有可能是分析柱本身的柱效下降導(dǎo)致的。
如果分離度在短時(shí)間內(nèi)急劇下降伴隨柱壓上升， 可能是有強(qiáng)極性溶劑損害了柱子；如果分離度在長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)慢慢下降，可能是柱頭受污染或柱頭塌陷，需要更換保護(hù)柱或者更換分析柱。
4.手性柱譜圖中的峰出現(xiàn)裂分，可能是什么原因， 該怎么辦？
峰裂分的原因有可能是色譜柱以外的色譜條件發(fā)生了變化，或者色譜柱受損柱效發(fā)生了變化。 有
時(shí)樣品溶液濃度太高，進(jìn)樣量太大也會(huì)裂縫， 這種情況只需減少濃度進(jìn)樣量即可。
如果排除了各種外在因素，那么色譜柱本身的原因可能是柱頭被污染，或者柱壓太高導(dǎo)致柱頭塌陷。
柱頭污染的話，可以按照說(shuō)明書(shū)采用不同的溶劑溶劑沖洗色譜柱，最好是反方向沖洗；或者更換保護(hù)柱。
如果是壓力太高導(dǎo)致柱頭塌陷，那么除了增補(bǔ)填料，基本沒(méi)有其他方法補(bǔ)救了，只能更換色譜柱。
5.基線不穩(wěn)定可能是哪些原因，如何解決？
?儀器剛從反相置換到正相系統(tǒng)時(shí)，基線會(huì)不穩(wěn)定， 只需要多平衡一會(huì)兒即可。
?檢測(cè)器污染。卸下檢測(cè)器，更換透鏡；或者取出透鏡，用甲醇、異丙醇、水或其他溶劑（根據(jù)該儀器平時(shí)的使用情況而定）超聲清洗。
安裝時(shí)注意透鏡的方向，一面是平面，一面凸透。
?確認(rèn)使用的兩元（或三元四元）流動(dòng)相彼此互溶性良好。
?確認(rèn)正使用的流動(dòng)相和儀器之前剛用過(guò)的流動(dòng)相彼此互融；若不互融，需要選擇合適的溶劑過(guò)渡。
?若噪音很大，有可能是需要更換氘燈。
?柱壓不穩(wěn)定導(dǎo)致的基線不穩(wěn)。
6.柱壓不穩(wěn)定的原因可能有哪些，如何解決？
?泵內(nèi)有空氣，解決的辦法是清除泵內(nèi)空氣，可用注射器抽出空氣
?比例閥失效，更換比例閥即可
?泵密封墊損壞，更換密封墊即可
?溶劑中的氣泡，解決的辦法是對(duì)溶劑脫氣，通常是超聲法脫氣。
?系統(tǒng)檢漏，找出漏點(diǎn)，密封即可。
?梯度洗脫，這時(shí)壓力波動(dòng)是正常的。
